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    乳鐵蛋白（lactoferrin， LF）是一種分子量約為 80 kDa的鐵結(jié)合糖蛋白，具有鐵調(diào)節(jié)[^[2]]、免疫調(diào)節(jié)[^[3]]、促進(jìn)骨生長(zhǎng)[^[4]]、保護(hù)消化系統(tǒng)健康[^[5]]等生理活性，是乳及乳制品中重要營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)之一，常被用作營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑添加在嬰幼兒配方食品中。但部分嬰幼兒會(huì)對(duì)乳蛋白過敏，需要食用含水解蛋白的嬰配乳粉或特醫(yī)乳粉。此類產(chǎn)品中的水解蛋白和多肽會(huì)干擾乳鐵蛋白檢測(cè)，導(dǎo)致國(guó)標(biāo)方法回收率不達(dá)標(biāo)。

    行業(yè)反饋后，國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心已明確現(xiàn)行的GB 5009.299-2024不適用于含有水解蛋白的嬰幼兒配方食品（其中包括特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品）[1]。

針對(duì)此問題，島津SGLC在國(guó)標(biāo)基礎(chǔ)上開發(fā)了專用緩沖鹽提取包，適用于乳蛋白部分水解、深度水解及氨基酸配方等特醫(yī)嬰兒配方乳粉，配合SHIMSEN肝素親和柱，可保證良好的回收率與重現(xiàn)性。相關(guān)方案如下：

一：樣品前處理

采用專用提取鹽包(適用于水解嬰配粉，P/N：380-00930-10) + SHIMSEN 肝素親和柱(3mg/3mL, PN: 380-00930-02)進(jìn)行樣品處理，實(shí)驗(yàn)操作和緩沖鹽配置請(qǐng)按照完整版應(yīng)用案例進(jìn)行，步驟如下：

①專用提取液配制方法：提取緩沖鹽瓶?jī)?nèi)加入375ml水，溶解，加入8g體積分?jǐn)?shù)為10%吐溫-20溶液，混勻，用磷酸調(diào)pH至6±0.2，用水定容至500ml；

②專用提取液的溫度不能超過50℃，否則乳鐵蛋白有失活的風(fēng)險(xiǎn)，致使回收率偏低，本實(shí)驗(yàn)采用48℃水??；

③離心完成后，立即移取10mL上清液到15mL離心管中備用，否則上層乳脂會(huì)逐漸再溶解到水溶液中，干擾后續(xù)的上柱以及上機(jī)分析；

④SHIMSEN 肝素親和柱包裝盒內(nèi)自帶磷酸鹽緩沖鹽包Ⅰ和Ⅱ，使用前按要求溶解定容后即可用于活化；

⑤小柱及待凈化液在上樣前要恢復(fù)到室溫；過柱時(shí)建議控制流速，每秒1-2滴(批量過柱時(shí)可采用自重流出)，流速過快會(huì)導(dǎo)致回收率偏低；

⑥優(yōu)先建議離心后直接上機(jī)分析，不通過針頭濾器，避免吸附損失；

⑦乳鐵蛋白容易被玻璃小瓶吸附，建議使用PP材質(zhì)的低吸附小瓶(PN：380-00511)。

話題二：上機(jī)分析

2.1 分析條件

儀器：Shimadzu LC-20AD 高效液相色譜儀